Ko te PCR, ko te tauhohenga mekameka polymerase ranei, he tikanga hei whakanui i nga raupapa DNA.I whakawhanakehia tuatahitia i te tekau tau atu i 1980 e Kary Mullis, i whakawhiwhia ki te Tohu Nobel mo te Matū i te tau 1993 mo ana mahi.Kua whakahurihia e te PCR te koiora ngota, e taea ai e nga kairangahau te whakanui i te DNA mai i nga tauira iti me te ako i nga korero.
Ko te PCR he tukanga e toru-taahiraa ka mahia i roto i te miihini hiko waiariki, he miihini ka tere te whakarereke i te pāmahana o te ranunga tauhohenga.Ko nga hikoinga e toru ko te denaturation, annealing, me te toronga.
I te taahiraa tuatahi, te denaturation, ka whakamahanahia te DNA whenu-rua ki te pāmahana teitei (te nuinga o te 95°C) ki te wawahi i nga here hauwai e mau ana i nga whenu e rua.Ka puta mai he ngota ngota ngota DNA kotahi-paetahi.
I te taahiraa tuarua, ko te whakapouri, ka whakahekehia te pāmahana ki te 55°C kia taea ai e nga mea tuatahi te whakauru ki nga raupapa taapiri i runga i te DNA whenu kotahi.Ko nga papa tuatahi he waahanga poto o te DNA i hangaia kia rite ki nga raupapa o te hiahia ki te DNA kua tohua.
I te taahiraa tuatoru, te toronga, ka whakanuia te pāmahana ki te 72°C kia taea ai e te Taq polymerase (he momo DNA polymerase) te whakahiato i tetahi whenu DNA hou mai i nga mea tuatahi.Ko te Taq polymerase i ahu mai i te huakita e noho ana i roto i nga puna wera me te kaha ki te tu atu ki nga wera teitei e whakamahia ana i roto i te PCR.
I muri i te huringa o te PCR, ko te hua e rua nga kape o te raupapa DNA i whäia.Ma te tukurua i nga hikoinga e toru mo te maha o nga huringa (te nuinga o te 30-40), ka taea te whakanui ake i te maha o nga kape o te raupapa DNA whaainga.Ko te tikanga tenei ka taea te whakanui i te iti o te DNA timatanga ki te whakaputa i nga miriona, tae atu ki nga piriona kape.
He maha nga tono a PCR ki te rangahau me te taatai.Ka whakamahia i roto i nga ira ki te ako i te mahi o nga ira me nga huringa, i roto i nga mahi a te hunga tuukino hei tātari i nga taunakitanga DNA, i roto i te tātaritanga mate hopuhopu kia kitea te noho mai o nga pathogens, me te tātaritanga i mua i te whanautanga hei tirotiro mo nga mate ira i roto i nga kukune.
Kua whakarereketia ano te PCR mo te whakamahi i te maha o nga rereketanga, penei i te PCR ine (qPCR), e taea ai te ine i te nui o te DNA me te whakamuri i te whakamaoritanga PCR (RT-PCR), ka taea te whakamahi hei whakanui i nga raupapa RNA.
Ahakoa te maha o ana tono, he herenga te PCR.Me mohio ki te raupapa whainga me te hoahoa o nga papa tuatahi e tika ana, a ka hee ki te kore e whakatika tika nga tikanga tauhohenga.Heoi, me te tupato ki te hoahoa me te whakatinanatanga, ka noho tonu a PCR tetahi o nga taputapu tino kaha i roto i te koiora irapoi.
Wā tuku: Feb-22-2023